3分鐘前 水稻RNA原位雜交檢測技術(shù)服務(wù)信賴推薦「多圖」[科銳諾44070b2]內(nèi)容：20世紀(jì)80年代的DNA原位雜交開啟了分子病理檢測的大門，隨后相繼出現(xiàn)了在組織切片上的原位雜交，目的是檢測肝1炎和肝1癌組織中的乙1肝1病毒。之后，越來越多的腫1瘤相關(guān)基因被發(fā)現(xiàn)，一批用于檢測靶向治1療藥1物靶點(diǎn)的分子病理技術(shù)迅速問世，如FISH檢測乳1腺癌HER2基因擴(kuò)增、ARMS法檢測肺1癌1基因突變等。

目前，我國已穩(wěn)定開展的分子病理技術(shù)主要有顯色原位雜交、熒光原位雜交、PCR、熒光定量PCR、基因芯片和DNA測序技術(shù)DNA原位雜交主要用于基因定位、特異基因(如病原微生物基因)檢測等;RNA原位雜交則用于基因表達(dá)檢測。原位雜交技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是操作簡單，可直接定位組織，價格低廉，信號穩(wěn)定，儲存方便，可做組織學(xué)評價，是目前應(yīng)用較多的分子病理技術(shù)之一。

既要充分保留被測核酸，（特別是RNA）不被降解，又要盡可能維持原有組織或細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)。

步驟：基本與免1疫組織化學(xué)技術(shù)相似，即組織要求新鮮和迅速投入固定液。固定液為4%多聚甲醛/0.1 M PBS（PH7.0-7.6），含有1/1000 DEPC。標(biāo)本較大時用刀片切成厚度不超過4mm的小塊，固定1小時即可，較大的標(biāo)本固定不要超過2小時。某些組織對過度固定尤其敏感，如動物大腦，固定時間30-40分鐘，一般不要超過1小時。取材過程中避免手指、唾液和未經(jīng)RNA酶抑制處理的器具接觸標(biāo)本。冷凍切片以厚5~30um佳，40℃烤箱內(nèi)干燥2小時后儲存在-80℃超低溫冰箱，在-20℃可保存２～３周，在-70℃可保存數(shù)月之久。

tunel流式細(xì)胞凋亡檢測服務(wù)通常稱為細(xì)胞程序性死1亡，是由基因控制的主動性細(xì)胞死1亡過程。越來越多數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞凋亡與多種疾病密切相關(guān)，如癌細(xì)胞具有連續(xù)增殖、抵抗細(xì)胞凋亡能力，利用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡可為腫1瘤診斷，療1效評價和預(yù)后預(yù)測提供了重要的參考指標(biāo)。

TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）細(xì)胞凋亡檢測試劑盒是用來檢測組織細(xì)胞在凋亡早期過程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況，其原理是生物素biotinylate標(biāo)記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT Enzyme）的作用下，可以連接到凋亡細(xì)胞中斷裂DNA的3’-OH末端，并與連接辣根過氧化酶（HRP，horse-radish peroxidase）的鏈霉親和素streptavidin特異性結(jié)合，后者又與POD底物H2O2、二氨1基聯(lián)1苯1胺（DAB）產(chǎn)生深棕色反應(yīng)，特異準(zhǔn)確地定位正在凋亡的細(xì)胞，因而在光學(xué)顯微鏡下即可觀察凋亡細(xì)胞；由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA斷裂，因而沒有3‘-OH形成，很少能夠被染色。本試劑盒適用于組織樣本（石蠟包埋、冰凍和超薄切片）和細(xì)胞樣本（細(xì)胞涂片）在單細(xì)胞水平上的凋亡原位檢測。還可應(yīng)用于抗腫1瘤藥的藥1效評價，以及通過雙色法確定細(xì)胞類型和分化階段。