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液相色譜柱的保存
1.反向色譜柱實驗后的保養:
使用緩沖液或含鹽的流動相,實驗完后應用10%的/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應該在水中加入10%的,防止將填料沖塌陷。
2.長期保存色譜柱:
如,色譜柱要長時間保存,必須存于合適的溶劑下,對于反相柱可以儲存于純或中,正相柱可以儲存于嚴格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲存于水中,并將堵頭堵上,儲存溫度盡量是室溫。
液相色譜儀基本系統組成簡介
載氣系統包括氣源、氣體凈化器、氣路控制系統。載氣是氣相色譜過程的流動相,原則上說只要沒有腐蝕性,且不干擾樣品分析的氣體都可以作載氣。常用的有H2、He、N2、Ar 等。在實際應用中載氣的選擇主要是根據檢測器的特性來決定,同時考慮色譜柱的分離效能和分析時間。載氣的純度、流速對色譜柱的分離效能、檢測器的靈敏度均有很大影響,氣路控制系統的作用就是將載氣及輔助氣進行穩壓、穩流及凈化,以滿足氣相色譜分析的要求。選擇氣體純度時,主要取決于分析對象、色譜柱中填充物以及檢測器,盡可能選用純度較高的氣體。這樣不但會提高(保持)儀器的高靈敏度,而且會延長色譜柱和整臺儀器(氣路控制部件,氣體過濾器)的壽命。實踐證明,作為中儀器,長期使用較低純度的氣體氣源,一旦要求分析低濃度的樣品時,要想恢復儀器的高靈敏度有時十分困難。對于低檔儀器,作常量或半微量分析,選用高純度的氣體,不但增加了運行成本,有時還增加了氣路的復雜性,更容易出現漏氣或其他的問題而影響儀器的正常操作。
液相色譜柱檢測器的功能
檢測器的功能是對柱后已被分離的組分的信息轉變為便于記錄的電信號,然后對各組分的組成和含量進行鑒定和測量,是色譜儀的眼睛。原則上,被測組分和載氣在性質上的任何差異都可以作為設計檢測器的依據,但在實際中常用的檢測器只有幾種,它們結構簡單,使用方便,具有通用性或選擇性。檢測器的選擇要依據分析對象和目的來確定。
數據處理系統目前多采用配備操作軟件包的工作站,用計算機控制,既可以對色譜數據進行自動處理,又可對色譜系統的參數進行自動控制。
液相色譜柱流動性
1、在進行樣品檢測前,至少使用20倍柱體積流動相使色譜柱充分平衡。流動相一定要使用色譜級別的溶劑。如使用水相的緩沖液應當天配制以保持新鮮避免細菌產生。
2、流動相使用前需用微孔濾膜過濾,消除流動相中顆粒對色譜系統和色譜柱的損壞。緩沖液與其他流動相混合后應重新過濾避免溶解度變化造成產生新的沉淀。不應使用純水作為流動相沖洗C18色譜柱,以免柱性能損壞(添加5%的沖洗色譜柱,同時可以達到對緩沖鹽清洗的作用。還可以使色譜柱更容易平衡)。
3、流動相需脫氣后使用,可避免因氣泡導致的泵和檢測器的工作不正常。如果測試時使用的流動相與色譜柱保存使用的流動相有較大區別,應該使用過度分布的形式進行平衡。避免由于流動相的突然變化造成柱壓增加過大或流動相緩沖鹽結晶造成對色譜柱和儀器系統的損壞。正相色譜柱比反相色譜柱需要更長的平衡時間。