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酶標(biāo)儀的采購(gòu)建議
測(cè)定的吸光度范圍通常,酶標(biāo)儀的吸光度測(cè)定范圍在0~2.5之間即可以滿(mǎn)足ELISA的測(cè)定要求。早期的酶標(biāo)儀可測(cè)定的吸光度一般在0~2.5之間,但現(xiàn)在基本上都做了拓寬,可達(dá)到3.5以上,并且能保持很好的精密度與線(xiàn)性。因此,對(duì)于酶標(biāo)儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線(xiàn)性和精密度如何。
光學(xué)系統(tǒng),酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道,亦有單通道)檢測(cè),一般為硅光管或光導(dǎo)纖維,除測(cè)定通道外,有的酶標(biāo)儀還有一個(gè)參比通道,每次測(cè)定可進(jìn)行自我校準(zhǔn)。酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)功能如何,均可通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定的吸光度范圍、線(xiàn)性度、精密度和準(zhǔn)確度等體現(xiàn)出來(lái)。光學(xué)系統(tǒng)好的話(huà),則上述指標(biāo)也應(yīng)較佳。測(cè)定的精密度與測(cè)定通道之間的均一性有直接關(guān)系。單通道可避免因通道不同所致的差異。
酶標(biāo)儀簡(jiǎn)介
酶標(biāo)儀,即酶聯(lián)檢測(cè)儀,是酶聯(lián)吸附試驗(yàn)的儀器。實(shí)際上就是一臺(tái)變相的光電比色計(jì)或分光光度計(jì),其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同。可簡(jiǎn)單地分為半自動(dòng)和全自動(dòng)2大類(lèi),但其工作原理基本上都是一致的,都是一個(gè)比色計(jì),即用比色法來(lái)分析抗原的含量。 ELISA測(cè)定一般要求測(cè)試液的體積在250μL以下,用一般光電比色計(jì)無(wú)法完成測(cè)試,因此對(duì)酶標(biāo)儀中的光電比色計(jì)有特殊要求。酶標(biāo)儀9602是由北京普朗研發(fā)生產(chǎn),儀器測(cè)量準(zhǔn)確,重復(fù)性好,能做定性和定量?jī)煞N檢測(cè),具有質(zhì)控功能;強(qiáng)大的數(shù)據(jù)處理功能,無(wú)需外接計(jì)算機(jī)即可做126個(gè)項(xiàng)目,自動(dòng)完成準(zhǔn)確的定量分析
酶標(biāo)儀的稱(chēng)呼
酶標(biāo)儀其實(shí)是一個(gè)習(xí)慣性稱(chēng)呼,它的學(xué)名叫讀板機(jī)(原因:測(cè)試時(shí)需要把溶液加入到96微孔板中,叫作讀板機(jī)是貼切的名字)。酶標(biāo)儀即酶聯(lián)檢測(cè)儀。是酶聯(lián)吸附試驗(yàn)的儀器,又稱(chēng)微孔板檢測(cè)器。
那么之所以習(xí)慣稱(chēng)為酶標(biāo)儀,是因?yàn)槠鸪鯂?guó)內(nèi)在使用微孔板時(shí),主要進(jìn)行以酶聯(lián)反應(yīng)的相關(guān)測(cè)試,所以在用戶(hù)的慣性驅(qū)動(dòng)下把讀板機(jī)改為了酶標(biāo)儀。
如何使用MK3酶標(biāo)儀測(cè)吸光度
1.將實(shí)驗(yàn)待測(cè)樣品分裝到多孔板上。96孔板推薦每孔100ul -200ul體積,384孔板推薦每孔50ul-80ul體積為宜。如因?qū)嶒?yàn)需要,同一塊多孔板上不同孔的樣品體積無(wú)法保持一致,需選用帶光程矯正功能的酶標(biāo)儀,將光程矯正到統(tǒng)一的數(shù)值,例如Molecular Devices品牌的酶標(biāo)儀。
2.打開(kāi)儀器 的微孔板艙門(mén),將多孔板放置入儀器內(nèi)并關(guān)上艙門(mén)。
3.打開(kāi)儀器軟件,在實(shí)驗(yàn)參數(shù)設(shè)置界面選擇ABS功能。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康目蛇x擇不同的檢測(cè)模式(Reader Type),包括終點(diǎn)法(Endpoint)、動(dòng)力學(xué)法(Kinetic)、孔域掃描(Well Scan)和光譜掃描(Spectrum)。
4.設(shè)置波長(zhǎng),版型,然后讀板,得到數(shù)據(jù)。