細胞實驗中的化學染色

1. 細胞實驗中細胞經jia基綠一呱咯寧混合液處理后，其中的 DNA 和 RNA 出現不同的呈色反應，一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和jia基綠具有親和力，且這兩種染料的作用有選擇性，jia基綠染高聚分子的 DNA 呈藍綠色，呱咯寧染低聚分子的 RNA 呈紅色。Perlsstain常用于顯示局部組織內各種chu血xing病變，常見于吞噬細胞內。由此對細胞中的 DNA 和 RNA 進行定位、定性、和定量分析。

2. 由于不同的蛋白質分子所帶的堿性和酸性基團的數目不同，在 pH 值不同的溶液中，蛋白質分子所帶的凈電荷多少不同。如在生理條件下，整個蛋白質所帶負電荷多，則為酸性蛋白質；帶正電荷多，則為堿性蛋白質。病理團隊介紹公司病理團隊成員具有豐富的病理從業經驗，熟練實驗操作和病理分析，通過長時間經驗積累，對于大部分病理染色均能熟練掌握，從試劑選擇到染色參數把控，建立了一套成熟的病理質量控制體系。據此，可將標本經三氯醋酸處理提出核酸后，用不同 pH 值的固綠染液分別染色，使細胞實驗中細胞內的酸性蛋白和堿性蛋白質顯示出來。

3. 過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物，用聯ben胺處理標本，細胞實驗中細胞內的過氧化物酶能把聯ben胺氧化為藍色的聯ben胺藍，進而變為棕色產物，因而可以根據顏色反應來判定過氧化物酶的有無或多少。

4. 組織、細胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用 PAS 法來顯示，其化學基礎是利用guo碘酸的氧化作用，打開碳鏈形成醛，生成的醛基與 Schiff 試劑中的無色品紅反應形成紫紅色化合物。

病理實驗外包常見染色介紹Warthin-Starry銀染：Warthin-Starry銀染染色原理在于螺旋體表面的黏蛋白與銀結合，呈黑色。

染色結果：菌絲及顆粒呈黑色，背景呈黃色。銀染一種是檢測聚酰胺凝膠中蛋白質的方法，其原理是銀離子在堿性 pH 環境下被還原成金屬銀，沉淀在蛋白質的表面上顯色。銀染的方法種類很多，有文獻報道的就有 100 多種。病理染色-VonKossa大鼠胸主動脈VonKossa染色VonKossa染色利用金屬離子置換反應檢測組織中鈣鹽沉積，由溶液中的銀離子置換組織中沉積的鈣離子。但是其準確的染色機制還不是特別地清楚。由于銀染的靈敏度很高，可染出膠上低于 1ng 的蛋白質點，故廣泛地用在 2D 凝膠分析上，及極低蛋白含量測定的垂直凝膠中。主要是用于垂直凝膠電泳中低豐度蛋白的檢測，如內源性GST-Pulldown、Co-IP等實驗中相互作用蛋白的研究 。南京英瀚斯，的病理染色實驗服務平臺。

病理實驗外包，病理染色組織樣本保存液多聚甲醛的配置：4%多聚甲醛固定液(4% Paraformaldehyde Fix Solution, 4% PFA Fix Solution)是一種廣泛用于組化

(Immunohistochemistry, IHC)、熒光(Immunofluorescence, IF)、細胞化學(Immunocytochemistry, IC)、流式分析(Fluorescence-activated cell sorting, FACS)等檢測時組織、組織切片、細胞等生物樣品固定的溶液。織學上，4%的多聚甲醛穿透力強，固定均勻，能使組織硬化，有利于切片。由于電子易散射或被物體吸收，故穿透力低，必須制備超薄切片(通常為50-100nm)。該固定劑造成的組織收縮少，損傷小，較為溫和，能很好的保存固有物質，保持組織的抗原性和細微結構。此外，多聚甲醛可用于固定并保存脂肪及脂類物質。南京英瀚斯，病理染色實驗服務平臺。

病理實驗外包，病理染色組織處理的要求：恰當的組織處理是做好組化染色的先決條件，也是決定染色成敗的內部因素，在組織細胞材料準備的過程中，不僅要求保持組織細胞形態完整，更要保持組織細胞的抗原 性不受損或彌漫，防止組織自溶。有人已經比較過霧化吸入和氣管內給藥這兩種方法，認為霧化吸入效果較好。如果出現自溶壞死的組織，抗原已經丟失，即使用很靈敏的檢測和高超的技術，也很難檢出所需的抗原，反而往往由于組織的壞死或制片時的刀痕擠壓，在上述區域易出現假陽性結果。

組織及時取材和固定

組織標本及時的取材和固定是做好組化染色的關鍵步，是有效防止組織自溶壞死，抗原 丟失的開始，離體組織應盡快的進行取材，好2h內，取材時所用的刀應銳利，要一刀下去切開組織，不可反復切拉組織，造成組織的擠壓，組織塊大小要適中，一般在2.5cm×2.5cm×0.2cm，切記取材時組織塊寧可面積大，千萬不能厚的原則，(也就是說組織塊的面積可以大到3cm×5cm，但組織塊的厚度千萬不能超過0.2cm，否則將不利于組織的均勻固定)。散射角的大小與樣品的密度、厚度相關，因此可以形成明暗不同的影像。固定液快速滲透到組織內部使組織蛋白能在一定時間內迅速凝固。從而完好的保存抗原和組織細胞形態。