5分鐘前 外泌體粒徑及濃度服務(wù)信賴推薦「科銳諾」[科銳諾44070b2]內(nèi)容：外泌體作為活1細(xì)胞分泌的含有RNA 和蛋白質(zhì)的微囊泡，直徑為 30-150nm之間，廣泛分布于外周血、尿液、唾液、腹1水、羊水等多種體液中。研究表明，外泌體包含多種活性分子，如蛋白質(zhì)、脂肪和核酸（mRNA、miRNA 及其它非編碼RNA ) 等， 能作為信號(hào)分子傳遞給靶1細(xì)胞，介導(dǎo)細(xì)胞間的物質(zhì)傳遞與信息交流，文獻(xiàn)報(bào)道體液中外泌體 RNA (特別是miRNA 等非編碼RNA）在不同的疾病模型中存在明顯的表達(dá)差異。同時(shí)，這些分子被外泌體的脂膜所包裹和保護(hù)， 能保持其原有穩(wěn)定性和生物學(xué)功能， 已經(jīng)成為液體活檢的重要分子標(biāo)志物。近年來， 外泌體已成為科研熱點(diǎn)，其在臨床上巨大的應(yīng)用價(jià)值， 引起了眾多研究者以及商業(yè)人士的濃厚興趣。隨著相關(guān)技術(shù)的發(fā)展， 有關(guān)外泌體在臨床疾?。ㄓ绕涫悄[1瘤）的早期診斷、治1療、預(yù)后及伴隨診斷的應(yīng)用研究正在蓬勃開展。通過高通量技術(shù)對(duì)外泌體 RNA進(jìn)行測(cè)序， 可快速高1效獲得外泌體RNA 的全1面信息，是疾病診斷和隨訪的理想手段。

NTA可以提供樣本中顆粒的粒徑分布和絕1對(duì)濃度，但不能夠以NTA所提供的濃度數(shù)值這個(gè)單一的指標(biāo)來定量外泌體。首先，我們必須理解NTA檢測(cè)原理：該技術(shù)基于布朗運(yùn)動(dòng)，通過視頻分析顆粒計(jì)數(shù)，可同時(shí)獲取樣本中顆粒的粒徑和絕1對(duì)濃度。

因此，樣本中的所有顆粒，都會(huì)被偵測(cè)并計(jì)入，而不能篩選出外泌體單獨(dú)進(jìn)行計(jì)數(shù)；同理：也不能通過NTA所提供的粒徑分布情況這個(gè)單一的指標(biāo)判斷所提取出的內(nèi)容物就是外泌體；例如下圖為常見的粒徑濃度分布圖，可以說明所提取的內(nèi)容物是在外泌體粒徑范圍內(nèi)，但是否為外泌體還需要結(jié)合其他方法綜合驗(yàn)證，譬如：透射電鏡、western blot等。

外泌體的組成：外泌體主要含有融合蛋白和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、熱休1克蛋白(HSP 70)、CD類蛋白以及磷脂酶和其他脂質(zhì)相關(guān)蛋白，但是不同來源的外泌體的組成有差異。

外泌體的提取方式：

1、離心法：此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足。

2、過濾離心：這種操作簡單、省時(shí)，不影響外泌體的生物活性，但同樣純度不足。

3、密度梯度離心法：用此種方法分離到的外泌體純度較高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜

4、免1疫磁珠法：這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高、操作簡單，但生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性。

5、色譜法：此種方法分離出的外泌體大小均一，但設(shè)備特殊，應(yīng)用不廣泛。