公司目前擁有多項產品及技術,其中發明兩項,軟件著作權八項,實用新型三項,商標兩件。公司先后獲得“江蘇省民營科技企業”、“江蘇省科技型中小企業”、“江蘇省專精特新中小企業”等榮譽資質,連續多年被評為“東南大學國家大學科技園企業”。結果:30%percoll密度梯度離心前CD117(c-kit)陽性細胞占13。2019年公司成為江蘇省生物技術協會第七屆理事會的特邀理事,成立了“李冬冬創新工作室”,并獲得了南京市“工人先鋒號”的榮譽稱號。
透射電鏡觀察:可見凋亡細胞表面微絨毛消失,核染色質固縮、邊.集,常呈新月形,核膜皺褶,胞質緊實,細胞器集中,胞膜起泡或出“芽”及凋亡小體和調亡小體被臨近巨噬細胞吞噬現象。
結果評判:調亡細胞體積變小,細胞質濃縮。調亡I期( pro-apoptosis nuclei)的細胞核內染色質高度盤繞,出現許多稱為氣穴現象( cavitati)的空泡結構; IIa 期細胞核的染色質高度凝聚、邊緣化;細胞凋亡的晚期,細胞核裂解為碎塊,產生調亡小體。PI為插入性核酸熒光染料,能選擇性的嵌入核酸DNA和RNA雙鏈螺旋的堿基之間與之結合,其結合的量與DNA的含量成正比例關系,用流式細胞儀進行分析,就可以得到細胞周期各個階段的DNA分布狀態,從而計算出各個期的百分含量。
磁性細胞標記方式
應用MACS技術進行磁性細胞分選重要的一點是高質量的標記。要盡可能地增強陽性細胞的標記,并減弱背景染色。有兩種基本的磁性標記方式:直接標記和間接標記。
1、直接磁性細胞標記(Direct magnetic cell labeling)
(磁珠結合的細胞就是所要分離獲得的細胞)直接標記是快速、zui特異的磁性標記方法。目前有多種分選人、小鼠、大鼠以及非人類靈長類細胞的MACS直標微珠可供選用。
2、間接磁性細胞標記(Indirect magnetic cell labeling )
(磁珠結合不需要的細胞,游離于磁場的細胞為所需細胞)間接磁性細胞標記需要聯合使用單ke隆或者多ke隆抗ti和MACS間標微珠。未結合抗ti、生物素化抗ti或者熒光素標記抗ti均可作為一抗標記細胞,再使用抗免yi球蛋白微珠、抗生物素或鏈霉親和素微珠、抗熒光素微珠作為二抗磁性標記細胞。幾乎針對任何種系任何細胞的任何一種單抗或多抗,均可用于間接標記。間接標記主要在如下情況時選用:當沒有直標磁珠時;需要用幾種抗ti的混合物同時分選或去除多種類型的細胞;間接標記有放大作用,因此可在磁性分選抗原表達弱的目的細胞時使用;使用自備或者配體的磁珠分選中。2作為標志分子,percoll離心后細胞懸液經FACS分選后獲得細胞純度。( -般而言,陰性分離法的磁珠用量比陽性分離法的大,陽性分離法用行更多。)