山東富舜新材料科技有限公司座落在美麗的“泉城”濟(jì)南。公司是集化學(xué)科研、開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)為一體的綜合型企業(yè)。我公司擁有先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)備,完善的產(chǎn)品檢測(cè)手段和質(zhì)量保證體系。我公司的員工具有較強(qiáng)的責(zé)任感。經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展,現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類(lèi)上百個(gè)品種。公司本著“誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)、專(zhuān)注品質(zhì)”的宗旨,參與到激烈的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)中來(lái),以好的產(chǎn)品質(zhì)量,優(yōu)惠的產(chǎn)品價(jià)格,令人滿(mǎn)意的銷(xiāo)售服務(wù),贏得大家的支持與信賴(lài)。山東富舜新材料科技有限公司的誠(chéng)信、實(shí)力和產(chǎn)品質(zhì)量獲得業(yè)界的認(rèn)可。歡迎各界朋友蒞臨參觀、指導(dǎo)和業(yè)務(wù)洽談。
考馬斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定蛋白質(zhì)含量的原理是什么
在酸性條件下,考馬斯亮蘭G-250染料與蛋白質(zhì)疏水區(qū)結(jié)合,導(dǎo)致da吸收峰由465 nm 變?yōu)?95 nm,同時(shí)顏色也由棕色變?yōu)樗{(lán)色,該藍(lán)色化合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度的高低成正比關(guān)系。將蛋白質(zhì)樣品或稀釋的BSA 與Bradford試劑混合,測(cè)量在595 nm處的吸收值,在建立由一系列稀釋的BSA建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的情況下,蛋白質(zhì)的濃度可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)而確定。
考馬斯亮藍(lán)G-250(Coomassie brilliant blue G-250)測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。在游離狀態(tài)下呈紅色,da光吸收在488nm;當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌鞍踪|(zhì)-色素結(jié)合物在595nm波長(zhǎng)下有da光吸收。其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比,因此可用于蛋白質(zhì)的定量測(cè)定。蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍(lán)G-250結(jié)合在2min左右的時(shí)間內(nèi)達(dá)到平衡,完成反應(yīng)十分迅速;其結(jié)合物在室溫下1h內(nèi)保持穩(wěn)定。
該法是1976年Bradford建立,試劑配制簡(jiǎn)單,操作簡(jiǎn)便快捷,反應(yīng)非常靈敏,靈敏度比Lowry法還高4倍,可測(cè)定微克級(jí)蛋白質(zhì)含量,測(cè)定蛋白質(zhì)濃度范圍為0~1 000μg/mL,xaio可測(cè)2.5μg/mL蛋白質(zhì),是一種常用的微量蛋白質(zhì)快速測(cè)定方法。
考馬斯亮藍(lán)有G250和R250兩種。其中考馬斯亮藍(lán)G250由于與蛋白質(zhì)的結(jié)合反應(yīng)十分迅速,常用來(lái)作為蛋白質(zhì)含量的測(cè)定。考馬斯亮藍(lán)R250與蛋白質(zhì)反應(yīng)雖然比較緩慢,但是可以被洗脫下去,所以可以用來(lái)對(duì)電泳條帶染色。
鑒別試驗(yàn)
(1)本品的水溶液(1+2000),顯藍(lán)色。
(2)取本品的水溶液(1+1000)5ml,加鹽酸1ml時(shí),變?yōu)榘迭S綠色。
(3)本品的硫酸溶液(1+100)顯暗橙色,取此液2-3滴加水5ml時(shí),顯綠色。
(4)本品的水溶液(1+1000)5ml,加(1+5)5ml,在水浴中加熱時(shí)變?yōu)樽霞t色。
(5)取本品0.1g,加銨溶液(3+2000)200ml 溶解,取此溶液1ml,加銨溶液(3+2000)配至100ml的溶液,在波長(zhǎng)628-632nm處有吸收帶。
純度試驗(yàn)
(1)水不容物 小于0.20%。
(2)氯化物、硫酸鹽 以總量計(jì),小于4.0%。
(3)重金屬 以Pb計(jì),小于20ug/g。
(4 以As2O3計(jì),小于4.0ug/g。
使用量:一般為0.025g/kg。
.使用方法:將準(zhǔn)確稱(chēng)量的本品置于容器中,逐漸加入適量溫水,并不斷攪拌使之完全溶解,所得溶液即可用于著色。
使用過(guò)程中應(yīng)注意避免或減少酸、減、氧化計(jì)、還原計(jì)、金屬離子、微生物等物質(zhì)的不良影響,并注意免受高溫與暴曬,以防褪色或變色。
復(fù)合著色劑的使用:根據(jù)需要,可將本品與本公司生產(chǎn)的其它色澤的著色劑按適當(dāng)比例配置各種不同的顏色。