6分鐘前 原位雜交試劑來電咨詢「多圖」[貝科新肽a5f8c59]內(nèi)容：

把濾膜放在紙巾上于室溫晾干后，把濾膜（編號面朝上）放在一張保鮮膜上，并在保鮮膜上作幾個不對稱的標(biāo)記，以使濾膜與性自顯影片位置對應(yīng)。

用第二張保鮮膜蓋住濾膜。加光片并加上增感屏于-70℃曝光12-16小時。

底片顯影后，在底片上貼一張透明硬紙片。在紙上標(biāo)記陽性雜交信號的位置，同時在不對稱分布點(diǎn)的位置上作出標(biāo)記。可從底片上取下透明紙，通過對比紙上的點(diǎn)與瓊脂上的點(diǎn)來鑒定陽性菌落。

和其它實(shí)驗(yàn)方法一樣，必須同時設(shè)對照試驗(yàn)以證明其實(shí)驗(yàn)結(jié)果特異性。對照試驗(yàn)的設(shè)置須根據(jù)核酸探針和靶核苷酸的種類和現(xiàn)有的可能條件去選定。ISHH的優(yōu)點(diǎn)是它的高度特異性，它可測定組織、培養(yǎng)的單個細(xì)胞或細(xì)胞提取物中的核苷酸含量。應(yīng)用高敏感度的性標(biāo)記cRNA探針在理想的ISHH的實(shí)驗(yàn)條件下檢測mRNA，其敏感度可達(dá)到20個mRNA拷貝/每個細(xì)胞。由于雙鏈DNA的穩(wěn)定性，在用ISHH定位DNA時很少發(fā)生丟失，降解，其敏感性高到能夠顯示在染色體鋪片上，有時甚至在組織切片上的單個基因拷貝。正因?yàn)槿绱耍瑢SHH結(jié)果的解釋應(yīng)持慎重態(tài)度，特別是前人未報告過的新發(fā)現(xiàn)。

原位雜交技術(shù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

原位雜交技術(shù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果包括陽性信號和陰性信號的判斷標(biāo)準(zhǔn)。陽性信號是指探針與目標(biāo)核酸序列特異性結(jié)合形成的雙鏈復(fù)合物，在顯色反應(yīng)、熒光染色或性同位素標(biāo)記下呈現(xiàn)出明顯的信號。陰性信號是指探針未與目標(biāo)核酸序列結(jié)合，不呈現(xiàn)任何信號。實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析需要結(jié)合探針的特異性和敏感性、組織或細(xì)胞的原始結(jié)構(gòu)以及實(shí)驗(yàn)條件等因素綜合進(jìn)行。

原位雜交技術(shù)還在以下生物領(lǐng)域有應(yīng)用：

生態(tài)學(xué)和環(huán)境科學(xué)：在生態(tài)學(xué)和環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域，原位雜交技術(shù)可以用于研究生物與環(huán)境之間的相互作用。例如，通過標(biāo)記特定基因的探針，可以檢測環(huán)境中微生物種群的分布和變化，進(jìn)而研究其對環(huán)境的影響和作用。

進(jìn)化生物學(xué)：在進(jìn)化生物學(xué)領(lǐng)域，原位雜交技術(shù)可以用于研究物種之間的遺傳差異和進(jìn)化關(guān)系。例如，通過比較不同物種之間基因序列的差異，可以揭示物種之間的親緣關(guān)系和進(jìn)化歷程。