每批試劑需做驗(yàn)證檢驗(yàn)：向一份100mL無(wú)菌水樣中接種含有糞大腸菌的質(zhì)控樣標(biāo)準(zhǔn)菌株，按照上述定量檢測(cè)步驟操作觀(guān)察結(jié)果，看結(jié)果是否在其范圍內(nèi)。

9 注意事項(xiàng)

9.1 如果水樣品有背景顏色，需做一個(gè)空白試驗(yàn)，與標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)結(jié)果相比較。

9.2 只可使用滅菌水，不含緩沖液的水，不含氧化劑的水進(jìn)行樣品稀釋。

9.3 此法所用試劑只用于常規(guī)水樣，不可用于濃縮水樣。

9.4 如水樣中含有過(guò)多的氯，則加入試劑可能顯藍(lán)光，則該水樣不可用此方法。

9.5 此法無(wú)需在無(wú)菌室中進(jìn)行，但操作過(guò)程因避免微生物污染。

9.6 檢測(cè)使用過(guò)的定量盤(pán)應(yīng)滅菌后棄去。把約30個(gè)定量盤(pán)放入防爆袋中，用繩子松松的扎住袋口，放入高壓蒸汽滅菌鍋中，121℃高壓滅菌20min后取出，在防爆袋上注明“生物垃圾已滅菌”方可棄去。

該檢測(cè)方法是普遍采用的檢測(cè)方法,相比我準(zhǔn)的檢測(cè)方法,如多管發(fā)酵及濾膜法具簡(jiǎn)便快捷，其選擇性培養(yǎng)基具有抑制雜菌的作用，假陽(yáng)性低

酶底物法為GB5750-2006收錄的用于大腸檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)方法，酶底物法是目前水中大腸檢測(cè)的方法，目前以其方便快捷，假陽(yáng)性低，適用大量樣品快速檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)正逐步被國(guó)內(nèi)檢測(cè)所認(rèn)可。

相對(duì)于多管發(fā)酵和濾膜法，酶底物法檢測(cè)步驟大大減少，而且對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求不高，檢測(cè)時(shí)間可減少到24小時(shí)，在日常水樣監(jiān)測(cè)及應(yīng)急監(jiān)測(cè)中具有很好的應(yīng)用前景，可及時(shí)檢測(cè)，預(yù)防，較大限度的減少重大公共安全事故的發(fā)生幾率。

檢測(cè)原理：

該檢測(cè)方法采用大腸產(chǎn)生β-半乳糖苷酶分解色源底物-onPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)使培養(yǎng)液呈黃色。大腸埃希氏菌產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4 - methyl-umbelliferyl-β-glucuronide）使培養(yǎng)液在波長(zhǎng)366 nm 紫外光下產(chǎn)生熒光的原理,來(lái)定性定量水中總大腸菌群、糞大腸菌群（耐熱大腸菌群）及大腸埃希氏菌。

酶底物法檢測(cè)工作原理酶底物法使用ONPG和MUG兩種營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)指示劑，其中ONPG試劑在36℃的培養(yǎng)基中會(huì)被總大腸菌群產(chǎn)生的特異性β-半乳糖苷酶分解代謝，使水樣從無(wú)色變?yōu)辄S色，在44.5℃的培養(yǎng)基中會(huì)被糞大腸菌群(耐熱大腸菌群)產(chǎn)生的特異性β-半乳糖苷酶分解代謝，使水樣從無(wú)色變?yōu)辄S色，MUG試劑在36℃的培養(yǎng)基中會(huì)被大腸埃希氏菌產(chǎn)生的特異性β-葡糖醛酸酶分解代謝，使水樣在紫外燈下發(fā)出熒光，從而實(shí)現(xiàn)水質(zhì)大腸菌群的檢測(cè)。