3輕柔刺激法
此方法在短期的睡眠剝奪實驗中應用較多,當實驗人員通過觀察大鼠行為或通過腦電波監護觀察到大鼠進入睡眠時,通過輕輕拍打大鼠籠子或應用聲音、光線的刺激促使大鼠保持清醒,必要時還可用紙卷、鉛筆或用手直接觸摸大鼠使大鼠無法進入睡眠。注意不能將大鼠移出籠外!此方法簡單易行,在腦電監護情況下可進行 TSD 或 SSD 實驗,在無腦電監護時需要實驗人員在旁不間斷觀察大鼠行為,故較適合行短時間的睡眠剝奪實驗。
4睡眠剝奪法
定時給大鼠注she, 此類方法簡單易行,操作方便,不需要特殊儀器。缺點是大鼠存在個體差異, 睡眠剝奪的效果及程度及不易掌握。多用在研究某些特殊藥理作用的實驗中。
造模方法步驟
一、.盲腸jie扎穿刺法(CLP):
1.實驗開始前禁食不禁水12h,小鼠腹腔注射戊巴b妥鈉,待小鼠wan全ma醉后仰臥位固定。
2.對腹部噴酒精和碘伏消毒,去除腹部表面毛發,使用手術刀在腹壁切2cm切kou,暴露盲腸,在回盲瓣遠端結扎盲腸,然后用針ci穿刺盲腸2次,輕輕擠壓盲腸,使少量的腸內容物滲出,將盲腸復位,縫合腹膜和皮膚。
3.小鼠正常飼養6h后皮xia注she30ml/kg生理鹽水和30mg/kg的頭bao曲松。
藥xiao學實驗-減肥功能的動物試驗評價方法
1 測試項目
1.1 原理
這種方法是用高熱量食物誘導動物肥胖,然后給試驗樣品(肥胖模型),或者同時給高熱量食物給試驗樣品(肥胖預防模型),觀察其變化動物體重和體脂含量。
1.2 肥胖模型法
SPF級雄性大鼠,體重180-220g,8-12只/組。在屏障系統下,給大鼠喂養維持飼料并觀察5-7天。按體重隨機分為兩組,10只給予維持飼料作為空白對照組,60只給予高熱量模型飼料。每周記錄喂食量、灑食量、剩食量,稱體重1次。喂養2周后,將給予高熱量飼料的60只大鼠按體重增加進行排序,剔除1/3體重增加較低的抗肥胖大鼠。選取40只肥胖敏感大鼠給予高熱量飼料6周,空白對照組同時給予維持飼料。
無水乙醇
二jia苯
高碘suan
偏重亞硫酸鈉
堿性品紅
蘇mu素
中性樹膠
實驗步驟
1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二ija苯Ⅰ20min-二jia苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ10min-無水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。2、高碘suan溶液處理:切片入高碘suan溶液10min,流水沖洗5min。3、Schiff試劑處理:切片入Schiff試劑10min,流水沖洗5min。4、蘇mu素染色:切片入蘇mu素染液1min,流水沖洗5min。5、快速脫水:將切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-無水乙醇Ⅰ5min -無水乙醇Ⅱ5min -二jia苯Ⅰ5min -二甲benⅡ5min中脫水透明,將切片從二甲ben拿出來稍晾干,中性樹膠封片。6、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。
染色結果:糖原呈紅色,細胞核藍紫色。
注意事項
染色后標本應及早觀察和記錄,染色后標本保存8天后,將逐漸褪色,保存時間延長,褪色更為明顯。